ZyGEM公司現推出*不同于傳統RNA提取的新型RNAGEM™核酸純化系列產品,主要有RNAGEM™ Tissue和RNAGEM™ Tissue Plus二大類,用于從哺乳動物細胞、激光捕獲微組織以及流式細胞檢測樣本如巨噬細胞等快速自動化提取RNA。
RNA提取實驗已經是大家耳熟能詳的基礎生物學實驗了,目前有關RNA提取的試劑盒產品也是五花八門,各具特色,我們也都知道,從原始樣本到試劑盒操作提取, 到核酸的步驟越多,無疑zui后得到的數據相對于樣本的真實性偏離得越遠,那么有沒有什么方法能打破這個局限性,盡量省去中間操作步驟而減少實驗誤差呢?又或許您手頭正有一批成百上千個樣本正要提取RNA用于下游實驗,但又沒有條件能用到核酸自動純化儀而且課題經費限制不能買與之配套的昂貴的純化試劑盒。所以,有沒有既簡便又實惠的純化試劑盒能滿足以上的要求呢?現在,我們非常肯定地告訴您答案:有。起福生物向您推薦Zygem公司生產的RNAGEM™核酸純化系列產品,輕松解決上述所有問題。
ZyGEM公司現推出*不同于傳統RNA提取的新型RNAGEM™核酸純化系列產品,主要有RNAGEM™ Tissue和RNAGEM™ Tissue Plus二大類,用于從哺乳動物細胞、激光捕獲微組織以及流式細胞檢測樣本如巨噬細胞等快速自動化提取RNA。所有的反應均在PCR管中進行,單管封閉操作,僅需控制溫度,整個過程只需20分鐘,中途無需過柱離心等煩瑣步驟,非常適合大規模自動化提取。所得的RNA無需純化,可直接用于RT-PCR。
一、核心技術RNAGEM™ Tissue產品核心技術源于Zygem公司*的酶的催化反應:EA1 蛋白酶,一種來自于新西蘭Mount Erebus環境微生物的蛋白酶。 該蛋白酶的特點:
ü 屬于金屬蛋白酶(Metalloproteinase )
Ø 在pH6.7時,具有*活性
ü 在75°C具有*蛋白酶活性
Ø 在75°C放置7天,沒有任何活性損失
Ø 在85°C的半衰期為1小時
Ø 在95°C的半衰期為10分鐘(5 mM CaCl2)
Ø 在95°C的半衰期少于1分鐘(200 µM CaCl2)
ü 95°C孵育5分鐘后,活性*喪失 ü 37°C沒有任何活性
EA1 蛋白酶與蛋白酶K的活性比較,下圖可以明顯看出,無論是在75度還是50度EA1 蛋白酶的活性遠遠高于蛋白酶K
In a 10 minute assay, Proteinase K at 50°C achieves only 3.7% of the specific activity of EA1 at 75°C.
In a 100 minute assay, this value is reduced to 2.1%
二、產品優點
RNAGEM™核酸純化系列產品,以其簡單方便的實驗操作和高質量的RNA得率,助您分析樣本zui真實的基因表達水平:
用于從哺乳動物細胞、激光捕獲微組織以及流式細胞檢測樣本如巨噬細胞等快速提取RNA的方法。
可實現快速、自動化地從細胞中提取核酸,包括RNA和DNA。
所得的RNA無需純化,即可直接進行RT-PCR反應。 操作步驟簡單且沒有原材料的損失, RNAGEM™ 甚至能夠從1個細胞中提取核酸。
工作流程: 其特點為:1-2-3,即1支管子,2 步反應,第3步就可以得到用于下游反應的核酸
RNAGEM™ 是已經優化好的試劑混合物,能夠有效裂解細胞、去除RNAses以及水解蛋白。RNA提取過程在75°C下進行,無需更高溫度。在使用RNAGEM™ Tissue PLUS試劑盒時,當提取過程結束后,即加入DNAse, 37°C 5min孵育,激活DNAse;之后升溫至75°C,激活RNAGEM酶,并且水解DNAse,而無需再加入EDTA。
Ø 操作簡單:無需多步驟離心、洗滌、真空抽濾和過柱。您需要的僅僅是一臺PCR儀或溫度控制加熱器。
Ø 安全:只需要5分鐘時間的孵育即可。無需用到有毒有害試劑,如GITC、苯酚、異丙醇等,單管封閉的操作體系有效降低汽溶膠污染和操作失誤,同時也降低實驗人員暴露各種生化環境所受的危險。
Ø 高產率:RNAGEM™ 能夠從10-100, 000個細胞中提取RNA,甚至可以從單個細胞中提取RNA,并且包括小分子量RNA,同時保持*的線性關系
Ø 無需純化:所得的RNA可直接用于RT-PCR。
產品所有優點都只為更好地應用于科研,讓實驗變得更簡單,更省心,更安心。
ü 無需花大量時間做樣本預處理
ü 無需昂貴的大型儀器及配套試劑ü 節省大量管和槍頭的費用
ü 避免接觸苯酚等毒害試劑,健康環保
ü 操作簡便省時,可以快速進入下游基因表達實驗,并得到100%可重復結果
ü 相比其它試劑盒RNA產量更高ü 提取所有RNA,包括非編碼RNA,如microRNA等
三、RNAGEM™與Trizol ®的比較
RNAGEM™與Trizol相比,無論是在實驗操作方面還是在RNA得率方面均顯示其*優勢。Trizol方法提取需經過裂解、洗滌、沉淀等許多步驟,但RNAGEM™卻集這些步驟為一體,只需一步孵育過程,即可得到高質量RNA。
• RNAGEM 基因拷貝數*的線性關系,即使低拷貝的基因也是如此
• RNAGEM 對于少量細胞的樣本量也可行,即使是單個細胞。所有試劑均與RT-PCR兼容
• 對于細胞數量少的樣本,Trizol 方法明顯有不足之處,RNA得率相對較低生物通 • RNAGEM簡單封閉單管操作,適合大規模自動化
• Trizol 實驗中的一些步驟如沉淀或洗滌等很難統一,因此不同樣本間一致性較差
RNAGEM™ out-performs Trizol® over a wide range of cell numbers
在上圖中,不同Hela細胞數目和mRNA拷貝數的關系,可以看出RNAGEM具有*的線性,不管是對高拷貝數的mRNA (ACTB),還是低拷貝的mRNA (BRCA1)。
10-100, 000個細胞中基因拷貝數與原始細胞量保持*的線性關系 除了以上介紹的RNA快速提取試劑盒,北京吉奧生物還擁有該公司的DNA快速提取試劑盒,可以廣泛用于法醫,畜牧,及基礎研究
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