ACCUTASE細胞消化液是一種用于細胞培養過程中分離貼壁細胞的酶溶液。含有多種蛋白酶,能夠有效地降解細胞間的蛋白質,從而使貼壁細胞脫離培養容器的表面,便于進行細胞傳代、計數或實驗分析。主要作用是降解細胞間以及細胞與培養容器表面之間的蛋白質粘附分子,如細胞外基質蛋白和細胞黏附分子。這些蛋白酶能夠識別并切割特定的肽鍵,從而破壞細胞間的連接,使細胞能夠從培養容器表面脫落,達到分離細胞的目的。
1.溫和性:相對于傳統的胰酶(Trypsin-EDTA)消化液,ACCUTASE通常更為溫和,對細胞的傷害較小,尤其適用于對細胞狀態要求較高的實驗。
2.廣譜性:ACCUTASE能夠作用于多種類型的細胞,包括上皮細胞、成纖維細胞等,應用范圍廣泛。
3.高效性:ACCUTASE的消化效率較高,能夠在較短的時間內實現細胞的有效分離。
4.無EDTA:與傳統的胰酶消化液不同,ACCUTASE中不含EDTA,因此不需要擔心EDTA對細胞的潛在影響。
應用領域:
1.細胞培養:用于細胞的傳代、分瓶、計數等常規操作。
2.細胞生物學研究:在進行細胞遷移、侵襲、克隆形成等實驗前,需要將細胞從培養皿中分離出來。
3.組織工程:在構建組織工程支架時,需要將細胞從原組織中分離出來。
4.臨床應用:在某些細胞治療或檢測中,需要將細胞從患者體內分離出來進行體外培養。
ACCUTASE細胞消化液的操作流程:
1.觀察細胞:在開始消化前,先在顯微鏡下觀察細胞的生長狀態,確保細胞適合進行消化。
2.清洗細胞:用生理鹽水或PBS緩沖液清洗細胞,去除培養基中的血清和抗生素,以免影響消化效果。
3.添加消化液:向培養容器中加入適量的細胞消化液,覆蓋細胞表面。
4.孵育:將培養容器放入培養箱中孵育一段時間,時間根據細胞類型和密度而定。
5.觀察分離:在顯微鏡下觀察細胞是否已經從容器表面脫落,變成圓形懸浮狀態。
6.中和消化:加入含血清的培養基以中和消化液的作用,終止消化過程。
7.收集細胞:用移液器輕輕吹打細胞,使其全脫落,然后將細胞懸液轉移到離心管中。
8.離心:通過離心收集細胞沉淀,棄去上清液。
9.重懸:用新鮮培養基重懸細胞,進行后續實驗或重新接種培養。